A Drosophila Atg9 autofágia gén szerepe az aktin citoszkeleton szabályozásában

Előnézet	PDF (disszertáció) Download (3MB) | Előnézet
Előnézet	PDF (tézisfüzet) Download (225kB) | Előnézet
Előnézet	PDF (tézisfüzet) Download (168kB) | Előnézet

Magyar nyelvű absztrakt

Vizsgálataink során a Drosophila Atg9 génjének szerepére fókuszáltunk. Előállítottuk az Atg9 génre null mutáns muslicatörzset (Atg9B5) CRISPR/Cas9 technológia alkalmazásával. Drosophila-ban az Atg9 hiánya az autofágia mutánsokra jellemző fenotípusokon túl a nőstények jelentősen csökkent termékenységét okozta. A nőstények által lerakott peték jelentős része kisebb, ún. „dumpless” pete volt, melynek hátterében az ivarvonal sejtekben működő aktin sejtváz hibáját sejtettük. Sejtésünket megerősítette, hogy az Atg9 a dajkasejtekben a membránba benyomódó aktin kábelek végeinél volt jelen. Ezekből a megfigyelésből kiindulva igazoltuk, hogy az Atg9 genetikai kölcsönhatásban áll az aktin kábelek szabályozásában részt vevő két szabályozó génnel, az ena-val és a chic-kel. Az aktin szabályozás a különböző sejttípusokban, de fajok között is konzerváltan működik, valamint az Atg9 is egy konzervált gén, ez magyarázatot adhat, hogy az Atg9 aktin-szabályozó hatása a csírasejteken túl, az idegrendszer fejlődésében is kimutatható volt. Eredményeink felvetik a lehetőségét, hogy az Atg9 más organizmusokban, például emlősökben szintén szerepet játszhat a sejtváz kialakulásában, illetve stabilizálásában.

Absztrakt (kivonat) idegen nyelven

In our study, we focused on the role of the Drosophila Atg9 autophagy gene. The Atg9B5 null allele was generated using CRISPR/Cas9. In Drosophila, lack of Atg9 led to typical autophagy defects regarding shorter lifespan, neuromuscular defects and reduces stress tolerancy, moreover, Atg9B5 mutation led to reduced fertility of females. In germline cells, Atg9 localized in the plasma membrane closed to tip of actin cables, as well as lack of Atg9 caused abnormal actin cable formation. Atg9B5 females often laid smaller eggs suggesting the “dumpless” phenotype, that could be the result of the defective actin organisation in nurse cells. These observations raised the possibility, that Atg9 was involved in actin regulation. Genetic interactions were identified between Atg9, and two actin regulators, ena and chic. Due to the actin organization takes place on a similar way organism-wide, it may explain why Atg9B5 led to defective neuron growth, similarly to some of ena or chic mutant alleles. Atg9 is a highly conserved protein and is present in many organisms, e.g. mammals, thus our results propose a similar actin-regulatory role for Atg9 in higher order organisms, as well.

Tétel nézet