A búza (Triticum aestivum L.) kloroplasztisz lokalizált glutamin-szintetáz enzim allosztérikus szabályozása, a szubsztrátumszintű működés tanulmányozása

Németh Edit
A búza (Triticum aestivum L.) kloroplasztisz lokalizált glutamin-szintetáz enzim allosztérikus szabályozása, a szubsztrátumszintű működés tanulmányozása.
Doktori értekezés, Szegedi Tudományegyetem.
(2018)

[img]
Előnézet
PDF (disszertáció)
Download (3MB) | Előnézet
[img]
Előnézet
PDF (tézis)
Download (452kB) | Előnézet
[img]
Előnézet
PDF (tézis)
Download (445kB) | Előnézet

Magyar nyelvű absztrakt

A glutamin-szintetáz (GS, EC 6.3.1.4.) a nitrogén anyagcsere egy kulcsfontosságú több alegységes enzime. A GS nélkülözhetetlen a búzanövény megfelelő növekedéséhez és fejlődéséhez, emellett kiemelkedően fontos a szemfeltöltődés folyamatában. A búza levelében két izoformát különböztetünk meg: a citoplazmatikus GS1-et és a kloroplasztiszban lokalizált GS2-t, ahol is a GS2 a domináns izoforma. A GS2 a szén- és nitrogén-anyagcsereutak találkozásánál kap helyet el a biokémiai útvonalak térképén. Kísérleteink során tanulmányoztuk a búza (Triticum aestivum L. cv. Jubilejnaja-50) GS2 enzim kinetikai tulajdonságait, szubsztrátfogyasztását meghatározott körülmények között, valamint magnézium- és mangánkötő képességét. Kinetikai bizonyítékokat találtunk arra, hogy a szén-és nitrogén-anyagcsereutak találkozásánál a GS finomszabályozó szereppel rendelkezik, amely az enzim általunk kimutatott allosztérikus negatív kooperativitásán keresztül valósul meg. Ennek az allosztérikus negatív kooperativitásnak a regulátor szubsztrátuma a glutaminsav. A szabályozás leírására egy új, saját, közelítő matematikai modellt hoztunk létre, amellyel egy új GS2 működési modellel társítottuk. Ezen felül sikeresen kimutattuk, hogy az ATP szupraoptimális koncentrációban in vitro gátolja aGS2 aktivitását. Mindemellett igazoltuk, hogy búzában a Mn2+ a GS2 Mg2+-kötőhelyeinek feléről, feltehetőleg a kis Mg2+-affinitású n2 fémion-kötőhelyekről leszorítja a Mg2+-ot.

Absztrakt (kivonat) idegen nyelven

Glutamine synthetase (GS, EC 6.3.1.4.) is a key multimeric enzyme in nitrogen metabolism. GS is indispensable for the adequate growth and development of wheat plants, and extremely important for proper grain gilling process. There are two isoforms of GS in wheat leaves: the cytoplasmic GS1 and the chloroplast localized GS2, where GS2 is the predominant isoform. The GS2 takes place at the carbon-nitrogen metabolic branch point. We studied the kinetic properties of GS2 of wheat (Triticum aestivum L. cv. Jubilejnaja-50), its substrate consumption under various conditions and its magnesia and manganese binding capabilities. We showed kinetic evidence, that at the connection of carbon and nitrogen pathways GS is a fine regulator, and its enzymatic activity is regulated in a negatively cooperative allosteric manner. This allosteric negative cooperativity is driven by the regulatory substrate which has been identified as glutamic acid. To describe this regulation, we have created a new, approximate mathematical model, which can be associated with our newly introduced mechanistic model of GS2. We also showed that supraoptimal ATP concentration inhibits the activity of GS2 in vitro. In case of wheat GS2 half of the bound Mg2+ can be displaced by Mn2+, presumably this change occurs at the n2 metal binding sites, which have lower Mg2+ affinity.

Mű típusa: Disszertáció (Doktori értekezés)
Kulcsszavak: Glutamin-szintetáz, nitrogénanyagcsere, allosztérikus szabályozás, negatív kooperativitás, búza, mangán, alumínium
Doktori iskola: Biológia Doktori Iskola
Tudományterület / tudományág: természettudományok > biológiai tudományok
Magyar cím: A búza (Triticum aestivum L.) kloroplasztisz lokalizált glutamin-szintetáz enzim allosztérikus szabályozása, a szubsztrátumszintű működés tanulmányozása
Idegen nyelvű cím: The allosteric behaviour of chloroplast localized glutamine synthetase of wheat (Triticum aestivum L.), operational mechanisms at the level of substrates
Témavezető(k):
Témavezető neveBeosztás, tudományos fokozat, intézményEmail
Dr. Pécsváradi AttilaPhD, egyetemi docens SZTE TTIK Növénybiológiai Tanszékpecsvaradi@bio.u-szeged.hu
EPrint azonosító (ID): 9902
Publikációban használt név : Németh Edit
A mű MTMT azonosítója: 3344187
doi: https://doi.org/10.14232/phd.9902
A feltöltés ideje: 2018. nov. 08. 09:54
Utolsó módosítás: 2019. márc. 06. 14:47
Egyebek (raktári szám): B 6446
URI: http://doktori.bibl.u-szeged.hu/id/eprint/9902
Védés állapota: védett

Actions (login required)

Tétel nézet Tétel nézet

Letöltések

Letöltések havi bontásban az elmúlt egy évben