A búza (Triticum aestivum L.) kloroplasztisz lokalizált glutamin-szintetáz enzim allosztérikus szabályozása, a szubsztrátumszintű működés tanulmányozása

Németh Edit
A búza (Triticum aestivum L.) kloroplasztisz lokalizált glutamin-szintetáz enzim allosztérikus szabályozása, a szubsztrátumszintű működés tanulmányozása.
PhD, University of Szeged.
(2018)

[img]
Preview
PDF (disszertáció)
Download (3MB) | Preview
[img]
Preview
PDF (tézis)
Download (452kB) | Preview
[img]
Preview
PDF (tézis)
Download (445kB) | Preview

Abstract in Hungarian

A glutamin-szintetáz (GS, EC 6.3.1.4.) a nitrogén anyagcsere egy kulcsfontosságú több alegységes enzime. A GS nélkülözhetetlen a búzanövény megfelelő növekedéséhez és fejlődéséhez, emellett kiemelkedően fontos a szemfeltöltődés folyamatában. A búza levelében két izoformát különböztetünk meg: a citoplazmatikus GS1-et és a kloroplasztiszban lokalizált GS2-t, ahol is a GS2 a domináns izoforma. A GS2 a szén- és nitrogén-anyagcsereutak találkozásánál kap helyet el a biokémiai útvonalak térképén. Kísérleteink során tanulmányoztuk a búza (Triticum aestivum L. cv. Jubilejnaja-50) GS2 enzim kinetikai tulajdonságait, szubsztrátfogyasztását meghatározott körülmények között, valamint magnézium- és mangánkötő képességét. Kinetikai bizonyítékokat találtunk arra, hogy a szén-és nitrogén-anyagcsereutak találkozásánál a GS finomszabályozó szereppel rendelkezik, amely az enzim általunk kimutatott allosztérikus negatív kooperativitásán keresztül valósul meg. Ennek az allosztérikus negatív kooperativitásnak a regulátor szubsztrátuma a glutaminsav. A szabályozás leírására egy új, saját, közelítő matematikai modellt hoztunk létre, amellyel egy új GS2 működési modellel társítottuk. Ezen felül sikeresen kimutattuk, hogy az ATP szupraoptimális koncentrációban in vitro gátolja aGS2 aktivitását. Mindemellett igazoltuk, hogy búzában a Mn2+ a GS2 Mg2+-kötőhelyeinek feléről, feltehetőleg a kis Mg2+-affinitású n2 fémion-kötőhelyekről leszorítja a Mg2+-ot.

Abstract in foreign language

Glutamine synthetase (GS, EC 6.3.1.4.) is a key multimeric enzyme in nitrogen metabolism. GS is indispensable for the adequate growth and development of wheat plants, and extremely important for proper grain gilling process. There are two isoforms of GS in wheat leaves: the cytoplasmic GS1 and the chloroplast localized GS2, where GS2 is the predominant isoform. The GS2 takes place at the carbon-nitrogen metabolic branch point. We studied the kinetic properties of GS2 of wheat (Triticum aestivum L. cv. Jubilejnaja-50), its substrate consumption under various conditions and its magnesia and manganese binding capabilities. We showed kinetic evidence, that at the connection of carbon and nitrogen pathways GS is a fine regulator, and its enzymatic activity is regulated in a negatively cooperative allosteric manner. This allosteric negative cooperativity is driven by the regulatory substrate which has been identified as glutamic acid. To describe this regulation, we have created a new, approximate mathematical model, which can be associated with our newly introduced mechanistic model of GS2. We also showed that supraoptimal ATP concentration inhibits the activity of GS2 in vitro. In case of wheat GS2 half of the bound Mg2+ can be displaced by Mn2+, presumably this change occurs at the n2 metal binding sites, which have lower Mg2+ affinity.

Item Type: Thesis (PhD)
Creators: Németh Edit
Hungarian title label: A búza (Triticum aestivum L.) kloroplasztisz lokalizált glutamin-szintetáz enzim allosztérikus szabályozása, a szubsztrátumszintű működés tanulmányozása
Title of the thesis in foreign language: The allosteric behaviour of chloroplast localized glutamine synthetase of wheat (Triticum aestivum L.), operational mechanisms at the level of substrates
Divisions: Doctoral School of Biology
Discipline label: természettudományok > biológiai tudományok
Defence date label: 2018. November 26.
Uncontrolled Keywords: Glutamin-szintetáz, nitrogénanyagcsere, allosztérikus szabályozás, negatív kooperativitás, búza, mangán, alumínium
Item ID: 9902
Identification Number: 30617628
doi: https://doi.org/10.14232/phd.9902
Date Deposited: 2018. Nov. 08. 09:54
Last Modified: 2019. Apr. 01. 15:22
Depository no.: B 6446
Supervisor label:
Supervisor Supervisor scientific name label
Dr. Pécsváradi Attila
PhD, egyetemi docens SZTE TTIK Növénybiológiai Tanszék
Reviewer label:
Reviewer name label Reviewer scientific name label
Dr. Cséplő Ágnes
Dr. Hermesz Edit
PhD, tudományos főmunkatárs, MTA SZBK Növénybiológiai Intézet
PhD, habil. egyetemi docens, SZTE TTIK Biokémiai és Molekuláris Biológiai Tanszék
President label:
President name label President scientific name label
Dr. Vágvölgyi Csaba
DSc, tanszékvezető egyetemi tanár, SZTE TTIK Mikrobiológiai Tanszék
Member label:
Member name label Member scientific name label
Dr. Tóth Szilvia Zita
Dr. Bagyánszki Mária
PhD, tudományos főmunkatárs, MTA SZBK Növénybiológiai Intézet
PhD, habil. egyetemi docens, SZTE TTIK Élettani, Szervezettani és Idegtudományi Tanszék
URI: http://doktori.bibl.u-szeged.hu/id/eprint/9902
Defence/Citable status: Defended.

Actions (login required)

View Item View Item

Downloads

Downloads per month over past year