Investigations on cytosolic nucleic acid fragment induced innate immune functions of keratinocytes

Danis Judit
Investigations on cytosolic nucleic acid fragment induced innate immune functions of keratinocytes.
[Thesis] (Unpublished)

[img]
Preview
PDF (disszertáció)
Download (5MB) | Preview
[img]
Preview
PDF (tézis)
Download (550kB) | Preview
[img]
Preview
PDF (tézis)
Download (408kB) | Preview

Abstract in Hungarian

Tanulmányunkban a duplaszálú RNS és DNS molekulák által a keratinocitákban beindított immunfolyamatokat jellemeztük a pre- és poszttranszkripciós szabályozási mechanizmusok vizsgálatával. • Három keratinocita sejttípusban (NHEK sejtek, HaCaT és HPV-KER sejtvonalak) összehasonlítottuk a duplaszálú RNS és DNS által kiváltott citokin kifejeződés mennyiségét és időbeli kinetikáját. Eredményeink szerint mind a duplaszálú RNS analóg poly(I:C), mind a DNS analóg poly(dA:dT) beindítja a sejtek IL-6 és TNF-α kifejeződését, azonban a kifejeződés kinetikája és az indukció mértéke jelentős különbségeket mutatott. • Eredményeink szerint a poly(I:C) éa a poly(dA:dT) azonos jelátviteli útvonalakat indukál, bár eltérő kinetikával. A poly(I:C) és poly(dA:dT) transzfekció aktiválta az NF-κB és STAT útvonalakat, amelyek, a p38 útvonallal együtt szükségesek a citokinek kifejeződéséhez. Emellett kimutattuk, hogy az ERK1/2 jelátviteli útvonal a nukleinsav fragmentumok által beindított IL-6 kifejeződés negatív szabályozója a keratinocitákban, amely valószínűleg sejttípus specifikus funkció. • Megállapítottuk, hogy a poly(dA:dT) kezelés szignifikánsan csökkenti az NHEK sejtek PRINS kifejeződését, azonban a poly(I:C) nem befolyásolja a sejtek PRINS expresszióját. • Megmutattuk a PRINS nem kódoló RNS potenciális gyulladásgátló hatását a poly(dA:dT) indukált keratinocita immunfolyamatokban. A PRINS nem kódoló RNS szekvenciaspecifikusan kapcsolódhat az IL-6, valamint a CCL-5 mRNS-éhez, ami hozzájárulhat az mRNS-ek lebontásához, így szerepe lehet a poszttranszkripciós negatív szabályozásban. Eredményeink alapján feltételezzük, hogy a pikkelysömörös tünetmentes hámban tapasztalt magasabb PRINS kifejeződés e mechanizmus által hozzájárulhat a gyulladásos folyamatok szabályozásához, és a tünetmentes fenotípus fenntartásához.

Abstract in foreign language

In this study, we characterized the dsRNA and dsDNA induced immune responses in human keratinocytes by studying pre- and posttranscriptional regulation of cytokine expression. • We compared the dsRNA and dsDNA induced cytokine expression in three keratinocyte cell types: NHEKs, HaCaT cells and HPV-KER cells. We found that transfection by the synthetic dsRNA and dsDNA analogue poly(I:C) and poly(dA:dT) induce the expression of IL-6 and TNF-α with notable kinetic differences and rate of induction. • We found that poly(I:C) and poly(dA:dT) induce the same inflammatory signaling pathways in keratinocytes, albeit with different kinetics and magnitude of activation. Our data revealed that transfection with poly(I:C) and poly(dA:dT) induced activation of NF-κB and STAT signaling, which along with p38 signaling were also shown to be functional in inducing cytokine mRNA expression. We also showed the negative regulatory role of ERK1/2 signaling in nucleotide-induced IL-6 mRNA expression in keratinocytes, which seems to be a celltype specific event. • By studying the expression pattern of PRINS lncRNA, we found decreased expression upon poly(dA:dT) transfection in NHEKs, while poly(I:C) did not led to altered expression of PRINS. • We have identified a potential negative regulatory role for PRINS lncRNA in poly(dA:dT) induced IL-6 and CCL-5 expression. In-depth analysis of this phenomenon revealed the sequence specific interaction between PRINS and the mRNA of IL-6 and CCL-5, which might be responsible for the posttranscriptional control of the mRNA expression. These results led us to hypothesize, that elevated PRINS expression in psoriatic uninvolved epidermis may contribute to downregulation of the inflammatory functions in psoriatic keratinocytes and maintenance of the normal phenotype.

Item Type: Thesis (PhD)
Creators: Danis Judit
Hungarian title label: A citoszolikus nukleinsavak által kiváltott keratinocita immunfolyamatok vizsgálata
Divisions: Doctoral School of Clinical Medicine
Discipline label: Medicine > Clinical Medicine
Defence date label: 2018. May 23.
Item ID: 9806
MTMT id: 30611649
doi: https://doi.org/10.14232/phd.9806
Date Deposited: 2018. May. 09. 14:47
Last Modified: 2020. Jun. 17. 14:26
URI: http://doktori.bibl.u-szeged.hu/id/eprint/9806
Defence/Citable status: Defended.

Actions (login required)

View Item View Item

Downloads

Downloads per month over past year